背景：

来自Streptococcus pyogenes的 IdeS protease是仅在铰链区下方的一个特定位点裂解IgG以产生F(ab')2和Fc片段的免疫球蛋白降解酶。由于IdeS protease在一个特定位点消化IgG，因此延长孵育时间也没有过度消化的风险。

Rhinogen^® Immobolized IdeS Cut-Pure Kit，Microspin包含用于抗体消化的Immobilized IdeS，Microspin和用于F(ab')2片段以及Fc片段分离的Protein A纯化柱。

Rhinogen^® Immobilized IdeS，Microspin使用经过改造后的IdeS蛋白酶，因此具有更广的底物特异性，可有效切割人IgG1~4（切割位点如下表1）、猴、羊、兔的IgG，还可特异性切割小鼠IgG2a、IgG3。此外，Immobilized IdeS，Microspin 可在生理条件下切割IgG，从而保持酶切产物的免疫原性。

Protein A纯化柱采用了重组表达的Protein A，与天然Protein A相比，增强了与Fc结合的专一性，同时提高了蛋白稳定性。Protein A纯化柱能够特异性地结合多种免疫球蛋白的Fc区段。

包装规格：

Rhinogen^® Immobolized IdeS Cut-Pure Kit，Microspin包装规格如下：

一套Immobilized IdeS，Microspin及Protein A纯化柱可组合用于0.5mg IgG的酶切及纯化。

产品储存于20%乙醇中，不添加防腐剂。

储存条件：

采用冰袋运输，Immobilized IdeS，Microspin及Protein A 纯化柱产品均储存于20％乙醇中，收到产品后请立即将其置于2-8℃保存。避免冻存！

产品特点：

Rhinogen^® Immobolized IdeS Cut-Pure Kit，Microspin具有如下特性：

1. 比活性高：有效切割抗体下铰链，获得F(ab’)2和Fc片段；酶切效率≥90％；

2. 底物特异性广：能有效切割人IgG1~4、猴、羊、兔IgG、小鼠IgG2a、IgG3；

3. 回收率高：经消化后，纯化分离可收获F(ab')2，回收率＞80%以上；

4. 稳定性高：每批产品都经过严格的质量控制，以实现产品批间稳定性。 

应用：

重组抗体药物的结构表征分析， Fab片段的制备。

操作说明：

1. Rhinogen^® Immobolized IdeS Cut-Pure Kit，Microspin能有效地用于酶切及纯化人类、人源化、嵌合、羊、兔和猴的IgG，并对小鼠IgG2a和IgG3也具有中等活性，同时也适用于许多Fc-融合蛋白以及抗体药物缀合物（antibody drug conjugates，ADCs）的酶切及纯化。不适用于小鼠IgG1/IgG2b、大鼠、猪、牛或山羊IgG。此外，它不能切割非IgG同种型，包括IgA、IgM、IgD和IgE；

2. 对于小鼠IgG2a和小鼠IgG3的切割，建议适度提高孵育温度（酶切温度越接近37℃，则酶活越高）及孵育时间（2小时至过夜）；

3. 理想的IgG浓度应在0.5~20mg/ml的范围内；

4. 通过SDS-PAGE很容易确定目标蛋白的切割；

5. 最适的酶切反应缓冲液pH为6.0~8.0，在低于pH5.0体系中，Immobolized IdeS会不可逆的失活，在高于pH8.0体系中需要适当延长/优化反应条件；

6. 本产品仅供研究使用，不适用于人或动物的诊断及治疗用途。