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产品背景:
内切糖苷酶 F1(Endo F1)可在寡糖N-连接的二乙酰基壳二糖聚糖核心中的两个N-乙酰葡糖胺残基之间进行切割,从而产生截短的糖分子,其中一个N-乙酰葡糖胺残基则保留在天冬酰胺上。Endo F1可切割天冬酰胺连接的或游离的高甘露糖(低聚甘露糖)和杂合结构,但不是复杂的低聚糖。杂合结构的核心岩藻糖基化会使Endo F1的切割速率降低超过50倍。另外,Endo F1可水解含有高甘露糖链的硫酸盐,可在天然或非变性的去糖基化条件下使用。该酶适用于在天然条件下从糖蛋白中脱糖基化,适用于各种糖组学、蛋白质组学和质谱应用。
Rhinogen® Endo F1重组表达于E. coli,C端带6×His标签。不同于由Endo H,Endo F1可以从肽和蛋白质中切割高甘露糖和一些杂合型 N-聚糖。
产品规格:
Rhinogen® 内切糖苷酶 F1(Endo F1)包装规格如下:
目录号 | 规格 |
QPF-016-A | 0.33U/20μl |
QPF-016-B | 1U/60μl |
QPF-016-C | 3.3U/200μl |
配套试剂:
Rhinogen® 内切糖苷酶 F1(Endo F1)配套提供的试剂如下:
试剂 | 成分 | 规格 |
10×Glyco缓冲液5 | 500mMsodium phosphate,pH5.5 | 1ml |
产品来源:
Endo F1重组表达于E. coli,理论分子量约32 kDa,C端带6×His标签。
产品质量:
1. 高纯度:通过SDS-PAGE检测,纯度≥90%;
2. 高活性:比活>16U/mg、活性>17U/ml;
3. 高稳定性:每批产品都经过严格的质量控制,以实现产品批间稳定性。
酶活定义:
在 37˚C、pH 5.5 条件下,在 1 分钟内催化 1 μM变性核糖核酸酶 B (RNase B) 释放 N-连接寡糖所需的酶量。
应用:
1. 糖组学;
2. 糖型分析及糖基化位点的确定;
3. 蛋白质组学;
4. 质谱应用。
保存条件:
采用冰袋运输,2-8℃可储存12个月。避免反复冻融。
使用注意事项:
1. 对于不同的糖蛋白样品,需要实验摸索最适的酶浓度及反应时间。
2. 反应体系可以线性扩大。
3. 为防止微生物污染,尽可能无菌取用。
4. 较高的酶浓度可以提高单个糖蛋白的消化效率,需要根据实际情况优化。
5. 可适当分装以减少多次冻融带来的活性损失。
6. 本产品仅供研究使用,不适用于人或动的物诊断及治疗用途。
Q1:Endo F1 良好的阳 性对照是什么?
A1:RNase B可用作 Endo F1的阳性对照,可直观的通过SDS-PAGE观察切割效果
Q2:PNGase F 和 Endo F3 有什么区 别?
A2:内切糖苷酶 F1 会水解含有高甘露糖链的硫酸盐,它在寡糖的二乙酰壳二糖核 心中的两个 N-乙酰氨基葡糖残基之间裂解,产生一个截短的糖分子,其中一 个 N-乙酰氨基葡糖残基留在天冬酰胺上。相反,PNGase F 可完整去除寡糖。
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