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Bio-Glory™ One-Step萤火虫荧光素酶分析试剂盒

产品介绍

背景:

萤火虫荧光素酶Firefly Luciferase)是一种分子量为61kDa的蛋白,因其在宿主细胞中无背景萤光,同时无需翻译后修饰,是报告基因的理想选择。Bio-Glory™ One-Step萤火虫荧光素酶分析试剂盒为针对萤火虫荧光素酶开发的一款快速、稳定的一步法检测试剂盒,是Bio-Turbo™ One-Step 的升级产品,信号半衰期长达60min。主要开发用于ADCC或ADCP活性检测体系以及对灵敏度有特殊要求的其他检测项目。本试剂盒以D-荧光素(D-luciferin)为底物,在ATP、镁离子和氧气存在的条件下,可以被萤火虫荧光素酶催化进行氧化脱羧反应,产生激活态的氧化荧光素(Oxyluciferin),并产生生物萤光(Bioluminescence)(图1)。生物萤光与荧光素酶的启动子活性成比例,间接反映了细胞刺激物的生物学活性。

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图 1. 萤火虫荧光素酶底物的发光原理

本试剂盒信号半衰期长达60min,具有超高的检测灵敏度及超强的光输出,ADCC活性检测效果及与某知名大公司产品的检测效果对比如图2所示,可以检测最低10-20mol的荧光素酶,在10-20至10-14mol的酶浓度范围内呈很好的线性关系。

注意:实际读数会因细胞数量、转染效果、检测仪器等的不同而存在差异,图中数据仅供参考。

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图 2. Bio-GloryTM One-Step和某公司竞争产品对相同样品的检测效果

产品规格:

名称

货号

规格

Bio-Glory™ One-Step萤火虫荧光素酶测定试剂盒

RA-GL04

50ml

试剂盒组分:



•          荧光素酶反应底物(冻干粉)


1Vial

•          荧光素酶反应缓冲液


50ml

保藏条件:

采用冰袋运输。收到试剂盒后,可在-30 ~ -15℃长期保存。混合后的试剂反复冻融11个循环仍可保持稳定;为保证试剂出色的使用性能,未使用完的试剂建议-70℃保存。

特性:

Bio-GloryTM One-Step萤火虫荧光素酶分析试剂盒具有操作简便、灵敏度超高、发光值稳定等特点。

1.快速:荧光素酶检测5-30min内完成;

2.方便:将冻干粉底物与缓冲液简单混合即可使用,样品检测步骤简单;

3.高灵敏度:能够检测最低10-20mol的荧光素酶;

4.发光值稳定:半衰期长达60min。

Bio-GloryTM One-Step萤火虫荧光素酶分析试剂盒主要适用于ADCC、ADCP活性的常规检测及批签发检测指标。是抗体筛选、抗体糖基化修饰等研究的有效手段。同时,在对检测灵敏度有更高要求时,该试剂盒也可用于小分子化合物、重组蛋白药物活性的常规检测,如用于IFN、EPO、FSH、TSH、GH、GLP-1、PTH等药用蛋白的生物学活性检测。我们也提供一系列ADCC、ADCP效应细胞株 ,详情请咨询techserv@goodchengshi.com,或者登陆公司官网www.goodchengshi.com 查询。

应用:

Bio-Glory™ One-Step 萤火虫荧光素酶分析试剂盒超高的发光强度主要适用于ADCC、ADCP活性的常规检测及批签发检测指标。是抗体筛选、抗体糖基化修饰等研究的有效手段。同时,在对检测灵敏度有更高要求时,该试剂盒也可用于小分子化合物、重组蛋白药物活性的常规检测,如用于IFN、EPO、FSH、TSH、GH、GLP-1、PTH等药用蛋白的生物学活性检测。

注意事项:

我们也提供一系列ADCC、ADCP效应细胞株,详情请咨询techserv@goodchengshi.com,或者登陆公司官网www.goodchengshi.com 查询。

常见问题

Q1:检测没有信号或者信号强度低

A1:出现这个问题的原因可能有以下几种:荧光素酶测定试剂的低活性或失效、荧光素 酶低表达及荧光素酶发生了降解等,对应的解决办法或注意事项如下:

原因解决方案
Bio-GloryTM One-Step 荧光素 酶测定试剂的低 活性或失效配制新的底物试剂,未使用完的试剂建议于-70℃保存; 使用冻存的底物试剂进行检测时,需在25℃条件下避光解冻并 平衡至室温,颠倒混匀后使用。
荧光素酶低表达  1)用不同的启动子、效应细胞或者培养条件提高表达; 2)扩大每孔中样品和试剂的体积/浓度。
荧光素酶降解加入底物试剂室温孵育5min后,进行荧光读数。
化学发光检测仪 器不灵敏选择对荧光素酶检测灵敏的检测仪器。


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