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背景:
支原体(Mycoplasma)是对支原体科、无胆甾原体科和螺原体科的原核微生物总称,是已知可以自由生活的最小生物,没有细胞壁,形状多样可变,直径一般是 0.1~0.3μm,基因组 A-T 含量高,对常见的抗生素不敏感,对热敏感。目前已从污水、植物、动物、禽类、昆虫、人、温泉或其他高温环境中发现 200 种左右支原体。
细胞如果受到支原体污染,细胞生长速度变慢,细胞产生病变或形态改变。连续培养细胞污染的概率大约 15~35%,主要来源于 20 多种支原体,包括口腔支原体(M.orale)、肺炎支原体(M. pneumoniae)、发酵支原体(M. fermentans)、精氨酸支原体(M. arginini)、莱氏无胆甾原体(A. laidlawii)和猪鼻支原体(M. hyorhinis)。
人员操作、污染的细胞、原辅料(血清、胰酶、培养基),实验环境污染(生物安全柜、细胞间,培养箱)、实验仪器(水浴锅、液氮罐)、实验耗材(培养皿、方瓶、细胞工厂)都可能是污染源。污染了的细胞一方面对生产带来巨大影响,另外如果细胞产品、蛋白产品、病毒类产品受到支原体污染,最终会给患者带来潜在的健康风险。因此,监管部门要求企业对细胞库,检定用细胞和产品进行支原体检测,从源头上进行控制,尽早发现,确保放行产品不含支原体。对此,全球各国药物监管部门也发布了支原体检测相关指南,检测方法主要包括荧光染色法、培养法、核酸扩增法和生化检测方法。
概述:
Rhinogen® MycoAlarm™ 支原体检测试剂盒采用了生化方法进行支原体检测。利用支原体特有的 ATP 合成相关酶,在底物存在的情况下可以转化 ADP 为 ATP。存活的支原体溶解后,释放大量的酶与底物反应,促进 ADP 转化为 ATP,提供一种快速、灵敏的样品检测方法。通过对比加入底物后样品 ATP 含量的变化检测,即可通过前后含量变化比例来确定有无支原体。反应如下:
试剂包装:
Rhinogen® MycoAlarm™ 支原体检测试剂盒包装规格如下:
RA-MT01 规格:
试剂组分 | 货号 | 规格 | ||
25T | 50T | 100T | ||
MycoAlarm™ 检测试剂 (冻干粉) | RA-MT01A | 1×1.5ml | 1×3ml | 2×3ml |
MycoAlarm™ 底物试剂 (冻干粉) | RA-MT01B | 1×1.5ml | 1×3ml | 2×3ml |
MycoAlarm™ 测定缓冲液 | RA-MT01C | 1×4ml | 1×8ml | 2×8ml |
RA-MT02 规格:
试剂组分 | 货号 | 规格 |
MycoAlarm™ 阳性对照 (冻干粉) | RA-MT02A | 1×1.2 ml |
MycoAlarm™ 阳性对照稀释液 | RA-MT02B | 2×1.5 ml |
产品特性:
1. 操作简单:仅需20min即可检测细胞培养中是否有支原体污染;
2. 特异性高:不会受到细菌、真菌、酵母的干扰;
3. 发光值高:可以兼容多种发光读数计或者多功能酶标仪。
保存条件:
冰袋运输,收货后:
1)将RA-MT01试剂盒2~8℃存储,请勿冻存。试剂盒取出恢复至室温(20-22℃最佳), 复溶后取所需体积备用;
2)将RA-MT02试剂盒置于-70℃长期存储或-20℃短期存储,建议未使用部分试剂按用 量分装避免试剂反复冻融,试剂使用前请恢复室温(20-22℃最佳);
3)试剂复溶后置于-70℃保存,建议3个月内使用完。
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