背景:

萤火虫荧光素酶（Firefly Luciferase）是一种分子量为61kDa的蛋白，因其在宿主细胞中无背景萤光，同时无需翻译后修饰，检测快速、可靠和方便，是上述应用中报告基因的理想选择。Bio-Steady^TM One-Step萤火虫荧光素酶分析试剂盒为针对萤火虫荧光素酶开发的一款发光稳定、适合高通量筛选的一步法检测试剂盒，本试剂盒以D-荧光素（D-luciferin）为底物，在ATP、镁离子和氧气存在的条件下，可以被萤火虫荧光素酶催化进行氧化脱羧反应，产生激活态的氧化荧光素（Oxyluciferin），并产生生物萤光（Bioluminescence）（图1）。生物萤光与荧光素酶的启动子活性成比例，间接反映了细胞刺激物的生物学活性。

图1. 萤火虫荧光素酶底物的发光原理 

本试剂盒在常用的细胞培养基中可提供超过5小时的信号半衰期，并且不需要样品预处理。在标准实验室条件下，每小时可实现数千个样品的吞吐率，并且具有很高的重现性，非常适合高通量和超高通量（96/384/1536孔）的检测哺乳动物细胞中萤火虫荧光素酶报道基因的表达。可以检测最低10^-20mol的荧光素酶，在10^-20至10^-14mol的酶浓度范围内呈很好的线性关系。不同荧光素酶检测试剂盒的发光值衰减对比如图2所示。 

注意：实际读数会因细胞数量、转染效果、检测仪器等的不同而存在差异，图中数据仅供参考。

图2. Rhinogen^® 不同荧光素酶检测试剂盒的发光值衰减对比

产品规格:

保藏条件：

采用冰袋运输。收到试剂盒后，可在-30 ~ -15℃长期保存，混合后的试剂反复冻融11个循环仍可保持稳定。

混合前：Bio-Steady^TM One-Step荧光素酶反应缓冲液可在室温保存90天(> 90%活性)或在 2 ~ 8℃长期保存；

混合后：Bio-Steady^TM One-Step荧光素酶分析试剂可在室温保存1天(> 80%活性)或在2 ~ 8℃保存5天(> 85%活性)。为保证试剂出色的使用性能，未使用完的试剂建议-70℃保存。

特性：

Bio-Steady^TM One-Step 萤火虫荧光素酶分析试剂盒具有操作简便、试剂稳定、一致性良好、灵敏度高等特点。

1.方便：将冻干粉底物与缓冲液简单混合即可使用，样品检测步骤简单；

2.快速：荧光素酶检测5-30min 内完成；

3.更亮更持久的光信号：针对批处理和持续测量进行了优化，延长的强光输出时间有助于增加灵敏度，尤其是延长孵化时间的实验；

4.高灵敏度：能够检测最低10-20mol 的荧光素酶。

应用:

Bio-Steady^TM One-Step 萤火虫荧光素酶分析试剂盒主要适用于高通量和超高通量（96/384/1536孔）的检测哺乳动物细胞中萤火虫荧光素酶报告基因的表达，是抗体筛选、抗体质量控制的有效手段。

注意事项:

我们也提供一系列ADCC、ADCP效应细胞株，详情请咨询techserv@goodchengshi.com，或者登陆公司官网m.goodchengshi.com 查询。

Q1：检测没有信号或者信号强度低

A1：