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α1-2 Fucosidase

产品介绍

背景:

岩藻糖是许多寡糖(O或N-连)和多糖结构以及糖蛋白和糖脂的重要组成部分,它们通常与各种生物事件有关,包括受精、胚胎发生、细胞凋亡、信号转导和疾病进展,如类风湿性关节炎、炎症、癌症及囊性纤维化。糖缀合物的去岩藻糖基化是了解糖缀合物生物学效应的重要过程。

α1-2岩藻糖苷酶是一种高度特异性的外糖苷酶,它催化从低聚糖中水解线性α1-2连接的l -岩藻糖基(线性底物被定义为相邻的残基上没有分支)。

Rhinogen® α1-2 Fucosidase是利用大肠杆菌系统表达并经过多步层析纯化得到的重组糖苷酶,分子量大小约为97.7kD。中性条件具有活性,在37℃下获得最佳反应活性。根据消化底物不同可适当延长反应时间。

产品包装:

Rhinogen® α1-2 Fucosidase(α 1-2岩藻糖苷酶)包装规格如下:

目录号

规格

浓度

QPF-013-A

1000units

2000units/ml

配套试剂:

Rhinogen® α1-2 Fucosidase(α 1-2岩藻糖苷酶)配套提供的试剂如下:

目录号

试剂

成分

EB10

10×Glyco缓冲液3

200mM Tris,pH6.8

产品来源:

重组表达于E. coli,理论分子量约97.7KD,C端带6×His标签。

产品质量:

SDS-PAGE分析,纯度≥95%;没有检测到污染的外切糖苷酶、糖苷内切酶及蛋白酶活性。

产品特性:

α1-2 岩藻糖苷酶是一种高度特异性的外切糖苷酶,可催化水解糖蛋白或游离寡糖上α1-2 连接的岩藻糖。

酶活定义:

在 20 mM Tris pH 6.8 中在 37℃下孵育 30 分钟,一个单位的Rhinogen® α 1-2 Fucosidase可从≥90% 的 11 nmol 2'-fucosyllactose中水解岩藻糖。

保藏条件:

1. 采用冰袋运输, 收到产品后请立即将酶置于2-8℃;配套试剂置于-20℃储存。

2. 本品不含防腐剂,务必确保无菌操作取用,避免污染。

应用:

1. 聚糖结构分析;

2. 治疗性重组蛋白的表征及质量控制;

3. 消除糖蛋白的异质性。

特性:

Rhinogen® α1-2 Fucosidase是一种高度纯化和非常稳定的外切糖苷酶,具有稳定性高、与下游检测兼容等特点。

1. 高纯度:没有污染蛋白酶/其它糖苷酶,纯度≥95%;

2. 高稳定性:每批产品都经过严格的质量控制,以实现产品批间稳定性;

3. 与下游 HPLC、质谱兼容:不含甘油,酶切体系与 HPLC 及质谱工作流程环境兼容。

推荐使用方法:

1. 取1µg糖蛋白或者100nM寡糖样品,加纯化水至反应体系为9μl;

2. 加入1µl 10×Glyco缓冲液3;

3. 加入1-2 µl Rhinogen® α1-2 Fucosidase,轻柔混匀;

4. 37°C 条件下反应1小时。

注意:根据底物类型适当优化酶的浓度和孵育时间。

操作说明:

1. 对于不同的糖蛋白样品,需要实验摸索最适的酶浓度及反应时间;

2. 反应可以线性放大或缩小;

3. 对于不同的糖蛋白样品,所需酶量需要进行适当优化或根据经验确定最优的操作方法。在10~25μl反应体系中,对于1μg糖蛋白建议初始酶量1~2μl,反应1小时,如果没有完全消化,建议过夜处理。

注意事项:

本产品仅供研究使用,不适用于人或动物的诊断及治疗用途。

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